Преимплантационная пренатальная диагностика
Prosimptomy.ru

Медицинский портал

Преимплантационная пренатальная диагностика

Преимплантационная пренатальная диагностика

Пренатальная диагностика – это дородовое определение врожденной или наследственной патологии у плода. С организационной точки зрения все беременные (без специальных показаний) должны обследоваться для исключения наследственной патологии просеивающими методами (ультразвуковое обследование, биохимические исследования сыворотки беременных).

Особое внимание должно быть уделено проведению специальных методов дородовой диагностики по строгим показаниям для исключения конкретных наследственных заболеваний, уже имеющихся в данной семье.

Показаниями для проведения пренатальной диагностики являются:

• наличие в семье точно установленного наследственного заболевания;

• возраст матери старше 35 лет, отца – старше 40 лет;

• наличие у матери Х-сцепленного рецессивного патологического гена;

• беременные, имеющие в анамнезе спонтанные аборты, мертво-рождения неясного генеза, детей с множественными врожденными пороками развития и с хромосомной патологией;

• наличие структурных перестроек хромосом у одного из родителей;

• гетерозиготность обоих родителей при аутосомно-рецессивных заболеваниях;

В пренатальной диагностике используют неинвазивные и инва-зивные методы.

Неинвазивные методы пренатальной диагностики. Ультразвуковое исследование плода становится обязательным компонентом обследования беременных женщин. С развитием и совершенствованием оборудования и методики УЗИ становится возможным диагностика хромосомных болезней и врожденных пороков развития во втором триместре беременности. С помощью УЗИ диагностируются пороки развития конечностей, дефекты невральной трубки, дефекты передней брюшной стенки, гидро- и микроцефалия, пороки сердца, аномалии почек.

Для диагностики врожденной и наследственной патологии УЗИ необходимо проводить в динамике на ранних и более поздних сроках беременности. Сроки проведения УЗИ в России определены приказом Министерства здравоохранения. Это 10-13, 20-22 и 30-32 недели беременности.

Биохимические методы включают определение уровня альфа-фетопротеина, хорионического гонадотропина, несвязанного эст-радиола, ассоциированного с беременностью плазменного белка-А, сывороточного активина-А в сыворотке крови беременных. Эти методы являются просеивающими, как предварительные для выявления врожденных пороков развития (дефекты невральной трубки, дефекты передней брюшной стенки), многоплодной беременности, внутриутробной гибели плода, маловодия, угрозы прерывания, хромосомных заболеваний плода и других патологических состояний. Оптимальные сроки исследования – 17-20 недель беременности.

Инвазивные методы. К инвазивным методам относятся: хорио- и плацентобиопсия, амниоцентез, кордоцентез и фетоскопия.

Хорио- и плацентобиопсия проводятся в период с 7-й по 16-ю неделю беременности с целью получения клеток для пренатальной диагностики. Клетки ворсин хориона и плаценты несут такую же генетическую информацию, как и клетки плода. Анализ этих клеток цитогенетическими, биохимическими или молекулярно-генетичес-кими методами используется для дородовой диагностики многих наследственных болезней.

Амниоцентез – процедура получения амниотической жидкости (15-20 мл) путем пункции амниотического мешка через переднюю брюшную стенку или через влагалище на 16-20 неделе беременности. После 20-й недели количество «жизнеспособных» клеток значительно уменьшается. Клетки плода, содержащиеся в плодной жидкости, выращиваются на специальных средах для последующей диагностики всех Х-хромосомных болезней. Диагностика генных болезней молекулярно-генетическими методами возможна и без культивирования клеток. Молекулярно-цитогенетические методы (флуоресцентная гибридизация in situ – FISH) используют для диагностики хромосомных болезней. При проведении амниоцентеза возможны осложнения (гибель плода, инфицирование полости матки). Однако этот риск не превышает 0,5-1%.

Кордоцентез – взятие крови из пупочной вены плода проводится на 15-22 неделях беременности, некоторые специалисты проводят эту процедуру на более ранних сроках. Культивирование лейкоцитов дает возможность провести цитогенетический анализ. Кроме того, по образцам крови возможна биохимическая и моле-кулярно-генетическая диагностика наследственных болезней без культивирования.

Фетоскопия используется при проведении биопсии кожи или печени, либо при переливании крови плоду. С ее помощью может осуществляться прямое наблюдение плода, диагностика заболеваний кожи, нарушения развития половых органов, дефектов лица, конечностей и пальцев. Однако в настоящее время фетоскопия как метод дородовой диагностики применяется редко.

Преимплантационная диагностика

Преимплантационная диагностика – диагностика наследственных болезней на ранних стадиях развития зародыша (5 -7 день после оплодотворения). С ее помощью проводится первичная профилактика в семьях с высоким риском наследственной патологии, а также в случаях преодоления бесплодия при экстракорпоральном оплодотворении.

Получение преимплантационных эмбрионов возможно двумя путями: нехирургическим маточным лаважем и оплодотворением в пробирке. От зародыша отделяют 1-2 клетки и проводят анализ клеток с использованием ПЦР, FISH и других методов. Это позволяет диагностировать целый ряд наследственных болезней на ранних стадиях развития.

Пренатальная диагностика

Генетик Олег Глотов о биобанках, генетической диагностике и планировании ребенка

Unsplash.com

Поиск генетических маркеров

Международный проект «Сто тысяч геномов», посвященный расшифровке генома человека, имел три задачи: сбор биоматериала, его секвенирование и трансляция полученных знаний практикующим медикам. Для успеха медицинской генетики крайне важно, чтобы все три направления прорабатывались грамотно.

Если собранный биоматериал недостаточно охарактеризован, то исследователь или медик, который с ним работает, может войти в заблуждение. Пациенту обычно присваивается только один диагноз, однако практика показывает, что несколько диагнозов могут сочетаться. Когда исследователь изучает биоматериал пациента, он обращает внимание только на основной диагноз, тогда как первопричина болезни может крыться именно в сопутствующих диагнозах или симптомах.

Важно правильно хранить биоматериал, чтобы он оставался пригодным для исследований долгие годы. Допустим, мы хотим изучать редкое заболевание. Это следует делать на больших выборках, но единовременно в мире живет не так много людей с этой болезнью. Если мы сохраним биоматериал всех больных, которые жили за последние 50 лет, то, безусловно, при его исследовании получим гораздо больше пищи для размышлений. Важная работа по накоплению биоматериала ведется в биобанке СПбГУ, созданном моим братом и коллегой Андреем Глотовым. Это единственный биобанк международного уровня в России, который должным образом организован с точки зрения технического оснащения, имеет специальные криохранилища с подводкой азота, датчики температуры, системы контроля качества биообразцов и другие элементы, необходимые для качественного хранения биоматериала в соответствии с современными международными требованиями.

Генетическое тестирование родителей и плода

Идеальный вариант планирования ребенка выглядит так. Семейная пара приходит на консультацию к врачу-генетику. Тот назначает им секвенирование для проверки на наличие моногенных заболеваний. Допустим, оба супруга оказываются носителями какого-либо заболевания. Если оно рецессивное, то есть проявляется, только когда оба родителя — носители, когда мутации есть в обеих хромосомах, то вероятность рождения больного ребенка составляет 25%. В таком случае паре предлагается пройти преимплантационную генетическую диагностику. Пара обращается в ЭКО-центр и прибегает к процедуре оплодотворения in vitro. Полученные после оплодотворения эмбрионы тестируют и для имплантации используют только здоровые.

Чтобы исключить какую-либо другую патологию (никто не застрахован от нехорошей мутации в ходе деления клеток плода), проводят пренатальную диагностику. Предпочтительна неинвазивная пренатальная диагностика, которая требует от матери только анализа крови. Во время развития плода его фрагменты ДНК или целые клетки иногда мигрируют в кровоток. Это случайно обнаружили в 1990-х годах, но методы, которые позволили использовать подобный биоматериал для диагностики, появились в последние 7–10 лет. Сейчас неинвазивная пренатальная диагностика активно внедряется в практику во всем мире, ряд западных стран полностью на нее перешли. По сравнению с другими методами она намного точнее: позволяет видеть хромосомные нарушения и потихоньку «подбирается» к моногенным заболеваниям.

Иногда родители желают, чтобы зачатие произошло естественным путем. В этом случае они направляются на пренатальную диагностику в обязательном порядке. Если в ходе нее выясняется, что плод имеет нарушения (а вероятность такой ситуации — 25%), беременность рекомендуется прерывать, но, разумеется, решение всегда остается за родителями.

Читать еще:  Покалывание конечностей и возможные болезни

Основной инструмент, который используется для тестирования будущих родителей или непосредственно их плода, — секвенирование последнего поколения (NGS). Он выявляет большинство мутаций и генетических перестроек. Однако это не единственный метод. Для диагностики некоторых аномалий достаточно кариотипирования — микроскопического исследования набора хромосом. Например, оно позволяет увидеть, что часть материала с одной хромосомы «мигрировала» на другую. Более того, секвенирование в некоторых случаях этого не выявит — оно покажет совокупный генетический материал, но не его распределение по хромосомам. Еще один метод — полногеномная гибридизация (CGH). В нем ДНК плода смешивают с синтетической эталонной ДНК. Молекулы ДНК комплементарно спариваются, в результате чего удается протестировать геном на предмет лишних или недостающих копий ДНК или нарушений структуры.

Точность диагностики

Точность результатов инвазивной пренатальной диагностики достигает 100% (вероятность проявления диагноза у плода не всегда 100%: могут оказать влияние другие факторы). Точность неинвазивной диагностики составляет 98–99% в зависимости от срока беременности, веса матери, ее питания и так далее, ошибки бывают один раз на тысячу случаев. Возможен как ложноположительный результат — когда мы думаем, что у плода какие-то нарушения, а на самом деле их нет, — так и ложноотрицательный, когда не удается выявить существующую патологию неинвазивным методом.

Поэтому неинвазивная диагностика всегда должна сопровождаться УЗИ, благодаря которому фиксируются не только патологии развития, такие как нехватка пальцев, укорочение конечностей, неправильная работа сердца, но и маркеры возможных генетических дефектов. Однако УЗИ не верифицирует диагноз: например, при удлинении носовых костей плода есть просчитанная вероятность рождения ребенка с синдромом Дауна, но однозначного диагноза быть не может. Когда УЗИ-маркеры свидетельствуют о риске отклонения, показана инвазивная пренатальная диагностика.

Если лишняя 21-я хромосома обнаруживается, она никуда не денется, но бывают случаи мозаиков, когда мутация есть только в части клеток. Поэтому результат теста, который выглядит как однозначный, может в реальности быть неоднозначным в силу нюансов биологического свойства. Однако это крайне редкие случаи, которые подлежат дополнительному изучению, но не отменяют правило: диагностика точна.

Современное состояние генетической диагностики

В России данную отрасль медицины начал развивать ученый-генетик, член-корреспондент РАН, профессор Владислав Сергеевич Баранов, основавший в 1987 году лабораторию пренатальной диагностики в НИИ акушерства и гинекологии им. Отта (Санкт-Петербург). В мире пренатальная диагностика начала развиваться на несколько лет раньше. Ее развитие было обусловлено прогрессом молекулярно-генетических методов, в первую очередь открытием ПЦР — реакции, позволяющей многократно размножать интересующие исследователя фрагменты ДНК.

Сегодня происходит рывок в диагностике моногенных заболеваний — таких, которые определяются мутациями преимущественно в одном гене. В базах данных описано огромное количество характеристик более 8000 моногенных заболеваний, из которых около 5000 имеют клинически доказанные причины. Мы можем искать любую нозологию: эндокринные, неврологические, кардиологические проблемы или что-то еще. Базисный тест генетической диагностики («клинический экзом») включает анализ всех основных генов, связанных с моногенными заболеваниями. Технологии доступны в России в полном объеме, хотя специалистов здесь меньше, чем на Западе.

Также развивается диагностика более сложно наследуемых заболеваний. Мы можем искать их причины в геноме, однако интерпретация результатов поиска бывает затруднена. Существуют «полумоногенные» заболевания, к которым приводит мутация в двух-трех генах. Мутации по отдельности могут приводить, а могут и не приводить к развитию заболевания (в генетике это называется неполной пенетрантностью признака), а вместе они являются достоверным признаком болезни. Аллергии, гипертония, нарушения метаболизма являются полигенными заболеваниями, и для них возможна лишь диагностика предрасположенности, проявление которой будет носить вероятностный характер. Прогресс в диагностике сложнонаследуемых заболеваний следует ожидать через 5–10 лет, когда накопится достаточный массив данных, производимых новыми технологиями секвенирования.

Сегодня генетической диагностике лучше всего поддаются неврологические заболевания в силу их особенностей, более однозначных причин. Если врач поставил пациенту диагноз и отправляет его на генетическое тестирование, вероятность нахождения мутации (варианта) достигает 80–90%. В случае других классов заболеваний такая вероятность составляет 10–20%. Однако это говорит не о том, что диагнозы ставят неправильно, а о том, что на сегодняшний момент наши знания о генетических причинах заболеваний недостаточны, чтобы подтверждать их всем пациентам с помощью генетической диагностики. Причины, ведущие к одному и тому же заболеванию, могут быть разнообразными, и на сегодняшний момент мы умеем находить лишь 50% из них. Тем не менее все заболевания в той или иной мере генетические.

Одни и те же генетические факторы проявляются в разных системах органов. Например, низкорослость может заподозрить невролог, а может ортопед. Кто первым увидит свою проблематику, тот и ставит диагноз. Именно поэтому очень важно фиксировать сопутствующие диагнозы: каждый специалист видит свою проблему, и получается полное описание клинической картины. Врачи-клиницисты часто дают недостаточно полное описание фенотипа больных, что тормозит развитие диагностики.

Перспективы

Сейчас технологии преимплантационной и неинвазивной пренатальной диагностики хромосомных и моногенных заболеваний активно внедряются в России. Преимплантационная диагностика пока что больше развита в отношении хромосомных перестроек и патологий, чем моногенных заболеваний. Что касается пренатальной диагностики, среди беременных становятся очень популярными неинвазивные методы, так как они не несут риска выкидыша, связанного с инвазивными процедурами.

Предимплантационная генетическая диагностика

Применение преимплантационной генетической диагностики возможно исключительно в рамках программы ЭКО, и в свое время стало настоящим прорывом в области вспомогательных репродуктивных технологий. Возможность определять генетические нарушения на стадии доимплантационного развития – шанс значительно повысить эффективность лечения бесплодия и достигнуть главной цели – рождения здорового малыша в семье.

Показания к ПГД

Преимплантационная генетическая диагностика рекомендуется в случае диагностированных генетический нарушений у одного или обоих будущих родителей. Если у мужчины и женщины обнаружены нарушения в кариотипе, ПГД является одним из важнейших этапов в алгоритме предупреждения рождения ребенка с патологией и наступления беременности плодом с патологией. В данном случае ПГД предполагает исследование эмбрионов на анеуплоидии хромосом, вовлеченных в транслокации, а также на самые распространенные хромосомные нарушения (синдромы Дауна, Патау, Эдвардса).

Рис.1. Анеуплоидии у эмбриона по хромосомам 15, 20 и 21 у пациентки 40 лет методом NGS.

ПГД назначают при неудачах ЭКО и привычном невынашивании беременности. Как при естественном зачатии, так и в рамках программ ВРТ, основное количество (75-80%) прерываний беременности приходится на I триместр. Причинами невынашивания беременности могут быть как генетические отклонения эмбриона, так и многоплодие. ПГД при невынашивании беременности может помочь уменьшить частоту самопроизвольного прерывания. У пациентов с выкидышами в анамнезе уровень спонтанных абортов удалось снизить до 16.7% против ожидаемых 36.5%, у женщин старше 35 – до 12% против ожидаемых 44.5%.

Рис.2. Биопсия клеток трофэктодермы у эмбриона 5 дня развития.

Преимплантационная генетическая диагностика незаменима и в случае мужского фактора бесплодия, при выявлении высоких показателей генетических нарушений в сперматозоидах. Изучение хромосом в сперматозоидах, полученных от мужчин с олиго/астено/ тератозооспермией (ОАТ), показало повышенный уровень анеуплоидии (неправильный набор хромосом) по сравнению с мужчинами без отклонений в показателях спермограммы. У мужчин с нормальным кариотипом показатель частоты анеуплоидии половых хромосом в сперматозоидах наблюдали при олигоастенотератозооспермии в 4 раза чаще, чем при нормальной спермограмме. Применение для оплодотворения сперматозоидов с патологическим набором хромосом приводит к формированию эмбриона с генетической патологией, а затем, зачастую, к замиранию и невынашиванию беременности, или рождению ребенка с патологией.

Читать еще:  Почему после приема свеклы моча красная?

Рис.3. Генетическая диагностика у эмбрионов методом КФ-ПЦР.

Репродуктолог рекомендуют проведение ПГД, если возраст женщины превышает 35 лет, так как, к сожалению, существует медицинская статистика, позволяющая говорить, что в позднем репродуктивном периоде повышается риск рождения ребенка с генетической патологией, в том числе с синдромом Дауна и серьезными заболеваниями, пороками развития различных органов и систем.

Показания к проведению ПГД

  • случаи рождения детей с наследственной и врожденной патологией в анамнезе;
  • диагностированные сбалансированные хромосомные аберрации (транслокации и др.) в паре;
  • возраст женщины от 35 лет;
  • 2 и более неудачных попыток ЭКО в анамнезе;
  • замирание и невынашивание беременности в анамнезе, а также случаи пузырного заноса;
  • высокий процент сперматозоидов с генетической патологией у мужчины;
  • каждой семье, которая имеет желание провести ПГД в рамках программы ЭКО, чтобы быть уверенными в здоровье будущего ребенка и повысить шансы на успех лечения.

Рис.4. Уровень наступления беременности в рамках программы ЭКО с проведением генетической диагностики и без.

Возможности ПГД

Преимплантационная генетическая диагностика дает широкие возможности по выявлению генетических нарушений эмбрионов и позволяет осуществлять перенос перспективного, жизнеспособного эмбриона. Преимплантационная диагностика позволяет успешно реализовывать и актуальную тенденцию современной репродуктивной медицины – селективный перенос одного здорового эмбриона и наступление беременности одним плодом, так как многоплодная беременность имеет свои особенности и акушерские риски.

Рис.5. Результаты анализа, полученные с помощью метода CGH и NGS.

Таким образом проведение ПГД достоверно помогает:

  • увеличить частоту наступления беременности;
  • увеличить частоту благополучного вынашивания беременности;
  • снизить частоту наступления многоплодных беременностей;
  • снизить риски рождения ребенка с патологией.

Как и когда проводится ПГД?

Проведение преимплантационной генетической диагностики включает 2 этапа: получение клеток от эмбрионов с помощью специального лазерного оборудования, которое является безопасным для развивающихся эмбрионов; исследование полученного материала в генетической лаборатории.

Забор клеток для ПГД, как правило, проводится на 5-е сутки развития, на стадии бластоцисты. Именно в этот период у эмбриона уже достаточно много клеток, и, соответственно, ДНК для анализа, что позволяет получать более достоверные и надежные результаты диагностики.

Преимплантационная генетическая диагностика

Преимплантационная генетическая диагностика – комплекс мер, помогающий повысить успешность оплодотворения и выявить большинство возможных отклонений, которые могут появиться в ходе развития ребенка. ПГД осуществляется до переноса эмбриона в маточную полость. Для этого эмбриолог делает биопсию одного из бластомеров эмбриона (на стадии деления), а полученный материал отправляет на изучение в лабораторию. Преимплантационная генетическая диагностика показана особенно при высоком риске врожденных генетических патологий.

ПГД дает возможность выявить генетические отклонения, а также с высокой вероятностью дать прогноз дальнейшему развитию плода.

Данные, полученные в ходе проведения ПГД, подтверждаются в 95% случаев. Преимущество процедуры такого типа при ЭКО заключается в том, что она не требует селективного абортирования одного из плодов для получения результатов.

Стоимость преимплантационной генетической диагностики эмбрионов

Для проведения преимплантационной генетической диагностики нужны особая аппаратура и специальные расходные материалы, именно поэтому процедура является достаточно дорогостоящей. Кроме того, исследование требует участия большого числа профессионалов высокого уровня. В зависимости от вида преимплантационной генетической диагностики эмбрионов варьируется и ее цена. Узнать подробнее о возможностях диагностики, показаниях к ней и стоимости проведения процедуры в Национальном центре репродукции «ЭКО-Содействие» можно, записавшись на консультацию.

Наименование Стоимость
Кариотипирование с фотографией хромосом 6 000 руб.
Определение генетического пола эмбрионов и выявление анеуплоидий по 3-м хромосомам (21, X, Y) 60 000 руб.
Выявление пола и наиболее часто встречающихся анеуплоидий по 5 хромосомам (13, 18, 21, X, Y) 70 000 руб.
Выявление пола и наиболее часто встречающихся анеуплоидий по 7 хромосомам (13, 16, 18, 21, X, Y) 80 000 руб.
Выявление пола и наиболее часто встречающихся анеуплоидий по 9 хромосомам (13, 14, 15, 16, 18, 21, 22, X, Y) 90 000 руб.

Преимплантационная генетическая диагностика эмбриона

ПГД может проводиться только при ЭКО, а для увеличения числа и качества эмбрионов дополнительно используются методы ИКСИ и/или ИМСИ. Процедура является вспомогательной, потому ее проведение всегда согласовывается с будущими родителями. Воспользоваться ею могут все пациенты «ЭКО-Содействия», выбравшие подходящий метод оплодотворения.

Показания к проведению ПГД

Преимплантационная генетическая диагностика представляет собой молекулярное исследование хромосомного набора половых клеток или клеток зародыша, которое проводится до его помещения в полость матки. Этот метод диагностики показан в случае особого риска передачи ребенку генетических отклонений. Показания к ПГД:

  • в случае риска носительства у отца или матери генетических патологий (к таковым относятся, например, случаи заболевания гемофилией в семье матери – она может быть носителем этого гена);
  • два и более выкидыша в анамнезе;
  • нарушения сперматогенеза;
  • возраст родителей старше 35 лет;
  • случаи самопроизвольного аборта в результате резус-конфликта;
  • неудачные попытки ЭКО в прошлом.

Как проводится преимплантационная генетическая диагностика эмбрионов?

ПГД проводится двумя способами: методом анализа структуры яйцеклетки и анализа клеток эмбриона. Первый метод дает возможность выявить уровень риска только с материнской стороны, в то время как второй позволяет увидеть полную картину. Преимплантационная генетическая диагностика эмбрионов обычно выполняется на третий день. Специальный микроманипулятор извлекает клетку. Взятый образец анализируется с помощью флуоресцентных меток (т.н. метод FISH). Таким образом, определяется количество хромосом эмбриона и перспективы его развития в дальнейшем, что дает возможность поставить правильный диагноз.

Преимущества преимплантационной генетической диагностики

Выполнение преимплантационной генетической диагностики в рамках программ ЭКО позволяет:

  • повысить шансы забеременеть;
  • снизить риск невынашивания;
  • выявить причины неудачных попыток ЭКО;
  • минимизировать вероятность развития плода с врождёнными пороками и наследственными заболеваниями.

Одним из преимуществ ПГД является также то, что процедура не влияет на порядок проведения ЭКО.

Виды преимплантационной генетической диагностики эмбрионов:

  • Оп­ре­деле­ние по­ла по ме­дицин­ским по­каза­ни­ям.
  • Пре­им­план­та­ци­он­ный ге­нети­чес­кий скри­нинг (ПГС).
  • ПГД HLA-гап­ло­типа.
  • ПГД мо­ноген­ных за­боле­ваний.
  • ПГД при струк­турных хро­мосом­ных пе­рес­трой­ках.

Выбор пола ребенка

Цели ПГД – снижение риска появления на свет ребенка с генетическими отклонениями даже в случае предрасположенности к этому. В этих же целях возможно заранее определить пол ребенка: в случае риска передачи сцепленных с полом заболеваний это очень эффективный метод предотвращения. Например, в случае предрасположенности к гемофилии зачатие и рождение девочки предпочтительнее, чем мальчика.

Как это происходит? На практике все просто. В ходе преимплантационной диагностики наши исследователи получают материал эмбриона, который дает возможность выявить его половую принадлежность. А поскольку оплодотворяют в ходе ЭКО несколько клеток, у родителей появляется возможность выбора пола будущего ребенка среди всех возможных вариантов, ведь в итоге родится только один из них. Результат такой диагностики имеет высокую точность. Поскольку врачи полагаются на генетический материал, а не на снимок УЗИ или другие схожие по характеру данные, возможность ошибки исключена.

Читать еще:  Почки и мочевыводящая система у детей

Если для вас в ходе проведения ЭКО необходима услуга преимплантационной генетической диагностики, обязательно уведомите об этом врача центра «ЭКО-Содействие».

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД)

На базе клиники «Поколение НЕКСТ» организована лаборатория по проведению ПГД, в которой проводятся:

1. ПГД при хромосомных нарушениях:

скрининг анеуплоидий – для пациентов старше 35 лет (на 5-, 7-, 9-, 12- и 24 хромосомы);

определение транслокаций – когда у одного или двух супругов выявлены реципрокные (сбалансированные) или Робертсоновские транслокации;

2. ПГД моногенных заболеваний – для фертильных пар, в которых один или оба супруга являются носителями мутаций генов, вызывающих моногенные заболевания.

В нашей клинике ПГД на моногенные заболевания проводится:

на полярных тельцах, когда носителем мутации является женщина;

на бластомере 6-8 клеточного эмбриона, когда носителем мутации является мужчина или женщина;

на клетках трофектодермы, биопсированной у эмбриона, находящегося на стадии бластоцисты

ПГД на моногенные и хромосомные заболевания проводиться в 2 этапа:

Подготовительный этап: разработка дизайнов праймеров для двухраундной КФ-ПЦР-системы на мутацию и сцепленные с ней полиморфные маркеры для работы на единичных клетках. Опробование разработанной ПЦР-системы на единичных ядросодержащих клетках.

Что такое ПГД?

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) – это диагностика, которая позволяет при использовании молекулярных и цитогенетических методов отбирать здоровые от генетического заболевания эмбрионы, полученные при оплодотворении in vitro, для последующей пересадки в полость матки.

Уже в 1990 г. две независимые группы под руководством Ю.С. Верлинского и А. Хендисайда провели ПГД на Х-сцепленные заболевания и муковисцидоз, закончившиеся рождением здоровых детей. С этого момента ПГД стала широко использоваться во всем мире. В 1997 году под эгидой Европейского сообщества репродукции человека и эмбриологии был организован ПГД консорциум, который на сегодняшний день объединяет более 60 центров по всему миру. Цель создания данной организации- сбор данных и оценка эффективности ПГД, обучение, руководство и протоколы по проведению ПГД.

Преимплантационную диагностику надо рассматривать как альтернативу пренатальной диагностике. У пациентов, входящие в группу риска по моногенным и хромосомным заболеваниям, должен быть выбор, и они должны быть проинформированы о существовании клиник, где им может быть проведена ПГД.

Наследственные заболевания – это заболевания, возникновение и развитие которых связано с дефектами в наследственном аппарате клеток, передаваемыми по наследству через гаметы. Эти заболевания обусловлены нарушениями в процессах хранения, передачи и реализации генетической информации. При наследственных заболеваниях могут иметь место цитогенетические нарушения различного характера и локализации. Эти болезни также могут быть связаны с нарушениями отдельных участков ядерной (хромосомной) или митохондриальной ДНК. К наследственным болезням, обусловленными дефектами отдельных целых генов или единичными мутациями в генах, находящихся в ядерной ДНК, относятся моногенные заболевания. В настоящее время описано более 4000 вариантов моногенных наследственных болезней, подавляющее большинство которых встречается довольно редко. В России основным методом предупреждения рождения больных детей в семьях, где есть моногенное заболевание или заболевание, связанное со структурным нарушением хромосом, является проведение пренатальной инвазивной диагностики (биопсии ворсин хориона или проведение амниоцентеза) при уже наступившей спонтанной беременности. Это ставит родителей в крайне трудное положение, и требует принятия решения о прерывании беременности — процедуры, не только тяжелой с моральной точки зрения, но и имеющей значительное число возможных осложнений. Необходимо отметить, что практически во всех семьях, обратившихся в нашу клинику, в анамнезе была смерть ребенка от наследственного заболевания и 1—3 аборта вследствие обнаружения данного заболевания у плода при проведении пренатальной генетической диагностики.

Долгое время единственным показанием для проведения ЭКО оставалось бесплодие, но постепенно стала формироваться новая группа пациентов, обращающихся к ЭКО, — фертильные семейные пары из группы риска по передаче наследуемых заболеваний. Необходимость выполнения ЭКО фертильным пациенткам из этой группы риска обусловлена тем, что в настоящее время ЭКО является единственным способом получения эмбрионов человека в лабораторных условиях.

В 1983 году Кэри Муллис разработал ПЦР метод, который в дальнейшем дал возможность нарабатывать определенные участки генома из отдельных клеток. Усовершенствование этого метода привело к разработке метода преимплантационной диагностики.

ПГД в нашем центре

Для проведения ПГД в клинике используется метод количественной-флуоресцентной ПЦР (КФ-ПЦР) с использованием генетического анализатора AppliedBiosystem 3500. Данный метод имеет неоспоримые преимущества при проведении ПГД, так как позволяет:

1. Избежать полногеномной амплификации генома (дорогостоящая методика, приводящая к значительному неравномерному количественному искажению ДНК матрицы);

2. Работать с многочисленными (в настоящее время более 200 мест амплификации на единичный геном), локусными (высоко точными) участками ДНК, что позволяет:

успешно секвенировать амплифицированные участки генома, содержащие мутацию;

одновременно эффективно работать со системой сцепления (большое количество подобранных в ходе подготовительного этапа информативных микросателлитных маркеров) для идентификации больного и здорового гаплотипов. В тех ситуациях, когда невозможно точно определить мутацию при моногенных заболеваниях и ПГД приходится проводить по системе сцепления, КФ-ПЦР метод позволяет в процессе проведения ПГД устанавливать факт рекомбинации по системе сцепления и избегать переноса больных эмбрионов;

одновременно проводить как скрининг наиболее часто встречающихся хромосомных патологий, так и транслокаций.

3. Одновременно эффективно проводить генетическую идентификацию эмбрионального материала с использованием специально разработанных идентификационных панелей, так как параллельно используются панели родителей, что позволяет точно установить, как генетический статус эмбриона, так и избегать контаминации чужеродным генетическим материалом.

4. Низкая себестоимость диагностики: минимальное использование дорогостоящих импортных материалов или их более эффективное использование (имеется ввиду расходные материалы для генетического анализатора), индивидуальная разработка программы ПГД для каждой супружеской пары исключительно специалистами клиники «Поколение НЕКСТ», использование только дешевых по сравнению с импортными отечественных реактивов (наборы для выделения ДНК, ДНК-полимеразы, производство СибЕнзим, г.Новосибирск), синтез олигонуклеотидов на базе Научно-производственной компании СИНТОЛ (г. Москва).

5. Вся процедура, от момента биопсии эмбриона до получения конечного результата может занимать не более 6 часов, что позволяет произвести подсадку эмбриона в том же цикле ЭКО.

Для проведения ПГД на моногенные заболевания принимаются пациенты только с заключением из Медико-генетического центра, РАМН (Москворечье ул., д. 1). После проведения ПГД в случае наступления беременности пациенты обязательно проводят пренатальный скрининг, о чем они предварительно извещены при подписании информированного согласия.

Стоимость преимплантационной генетической диагностики

Не является публичной офертой!

Наименование Цена
ПГД моногенных заболеваний методом ПЦР (без биопсии бластомера) 100 000
ПГД анеуплодий методом ПЦР (12 хромосом)(без биопсии бластомера) 70 000
ПГД: Исследование 1-8 трофэктодермы эмбрионов на 24 хромосомы методом КФ-ПЦР, без биопсии 82 000
Подготовительный этап к ПГД моногенных заболеваний методом ПЦР 60 000
ПГД в криоцикле методом NGS за 1 образец (включая биопсию) МД Проект7 75 000

Полный перечень цен на услуги предимплантационной диагностики вы можете узнать на нашем сайте в разделе «Цены» или у администраторов клиники по телефону: 8 495 678 90 03

Список заболеваний

Список заболеваний, для которых была успешно проведена преимплантационная диагностика (ПГД) в клинике «Поколение НЕКСТ»:

Нейрофиброматоз I типа

Адреногенитальный синдром (сольтеряющая форма)

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector